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News Center流式细胞术评价肿瘤化疗疗效的作用流式细胞术不仅可对恶性肿瘤DNA含量进行分析,还可根据化疗过程中的肿瘤DNA分布组方图的变化去评估疗效,了解细胞动力学变化,对肿瘤化疗具有重要的意义。过去传统的3H-胸腺嘧啶核苷酸放射自显影计数标记指数的方法,由于费时、工序复杂等原因,不能适应临床大量标本的测定。流式细胞术可快速分析,并有程序化的计算机快速计算出各时相的百分比率,显示出肿瘤细胞群体的增殖能力。特别是近年来发展起来的DNA-Brdu掺入技术和抗Brdu的单抗荧光免疫技术在流式技术...
石蜡包埋组织单细胞样品制备方法存在的问题石蜡包埋组织单细胞制备方法的建立,使流式细胞术在肿瘤研究中得到更加广泛的应用。主要存在如下问题。1、样品中的碎片较多,所获得的DNA组方图质量不及新鲜组织好,组方图的细胞峰较宽,细胞峰CV值较大。2、异倍体率较少。由于组方图的细胞峰CV值增大,一些接近于二倍体的DNA异倍体峰位被掩盖。3、S期细胞百分比不如新鲜组织的S期计算准确,百分比计数往往偏高,这仍然与细胞峰增宽有关。4、DNA二倍体标准不稳定。在石蜡包埋肿瘤DNA倍体分析研究中,...
兔ELISA试剂盒尽量保持室温20-25℃,避免在通风口操作防止温度过低,过热和/或者蒸发。适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞上清液、尿液等等多种标本类型,不要在阳光直射下实验,防止过热及蒸发。在孵育期间,如果工作台温度过低,应该铺垫若干纸巾或者其他物料,水质量很重要,确保使用蒸馏或者去离子水,不要使用过期的兔ELISA试剂盒,加入样品或者试剂到空的微孔板时,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接触。孵育时间的计算越规范越好,兔ELISA试剂盒保持添加标准品的一致性,先添加标准品后添加...
免疫和肿瘤胞测定及分选中的应用细胞分选是FCM技术一项特殊的功能,在免疫研究及临床应用上占有重要地位。它的主要作用一是分选,二是鉴定,而分选又必须同鉴定结合进行。只要有相应的荧光标记,就可以分离出任何所需要的细胞群体,尤其是含量但对鉴定又非常主要的细胞,纯度可达95%以上。细胞周期中静止期细胞的分离R.Schwarting等制备一株抗核抗原的单克隆抗体Ki-67,它同细胞周期中G1、S、G2M期所有具增殖性的细胞结合,但不同G0期细胞反应,这样就可以用分选技术把静止期细胞分离...
细胞膜的流动性或微粘度膜的流动性或者微粘度,可以通过测量结合到膜双分子层中的疏水荧光探针的荧光偏振来研究。因为荧光分子吸收偏振光的几率和发射荧光的偏振度与荧光分子相对于激发光偏振面的空间取向有关。若以线偏振光激发随机取向的荧光分子,那么,与激发光偏振面取向一致的那些荧光分子具有zui大的吸收。由于多数荧光分子的激发太寿命是几毫微秒的数量级,已经吸收了偏振光的一部份荧光分子,到它们发射荧光时,已经偏离开它们的原始取向,使得发射出荧光偏振面的方向将发生变化。若用两个互相垂直的偏振...
抗体和其它分子的共价标记以共价键结合的荧光染料FITC既能标记细胞内总蛋白、又能更广泛地标记各种特异性配体。这些配体是能与不同的细胞结构很强很特异地结合的各种大分子和小分子,如蛋白、多聚核苷酸、脂类以及其他生物分子、被标记的特异性配体能够探测很多种细胞结构和功能的参量。例如:被标记的外源凝集素可检测细胞表面糖;被标记的抗体可检测表面抗原;被标记的多聚阳离子可检测表面电荷,被标记的激素、生长因子、神经递质和病毒等可以检测细胞受体;被标记的大分子、微生物或者塑料微球可检测细胞内吞...
Gram-Twort革兰染色液产品简介:革兰氏染色法是丹麦医生ChristainGram于1884年所发明,是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,亦是一种复染法。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,用以分类鉴定。通过此法染色可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G)和革兰+阴性菌(G)两大类。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要是肽聚糖层厚度和结构...
荧光测量荧光信号是由对细胞进行染色的特异性荧光染料受激后发射的。荧光波长与激发光波长不同且强度较弱,为此就要使用滤片以滤除非荧光信号并使用灵敏的探测器。下面我们将分别进行讨论。光源常用的光源有弧光灯和激光。弧光灯的结构简单、价格便宜、维修容易,但在单一谱线上的功率较弱。激光单色性好、功率强大、不易散焦,但结构复杂、价格昂贵、维修困难。至于选择某种光源的某条谱线做为激发光源,主要是依据被激发的物质,例如细胞的自身荧光物质或荧光染料的激发光谱而定。光源的谱线愈接近被激发物质的激发...