叶绿素（Chlorophyll）检测试剂盒（比色法）

叶绿素(Chlorophyll)检测试剂盒(比色法)

产品简介：

    叶绿体(Chloroplast)是光合作用的细胞器，在光合作用研究中，常需要用提取的叶绿体展开下游研究工作。叶绿体中所含的色素主要有两大类，叶绿素(包括叶绿素 a 和叶绿素b)和类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)，它们与类囊体膜上的蛋白质结合，成为色素蛋白复合体，其中叶绿素又称叶绿体色素(Chlorophyll)。

叶绿素(Chlorophyll)检测试剂盒(比色法)检测原理是叶绿素不溶解于水，而溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提叶绿素，根据朗伯-比尔定律，某有色溶液的吸光度(A)与其中溶质浓度(C)和液层厚度(L)成正比，即A=αCL，其中α为比例常数，当溶液浓度以百分比浓度为单位，层液厚度为1cm 时，α为该物质的吸光系数。在本试剂盒情况下，叶绿素a和叶绿素b在 665nm、649nm处有大吸收波，根据经验公式可计算出叶绿素 a、叶绿素b及总叶绿素含量。该试剂盒主要用于植物组织中叶绿素的提取以及定量检测叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量。该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

自备材料：

1、研钵或匀浆器

2、离心管

3、滤纸或纱布

4、比色杯

5、分光光度计
操作步骤(仅供参考)：

1、叶绿素提取：

①取菠菜或其他植物新鲜叶片，洗净，擦干，去中脉，称取剪碎的新鲜样品 0.1g，置于研钵或匀浆器，加入少量提取粉剂(约 50mg)和 1mlChlorophyll Assay buffer，研磨或匀浆成液态。

②将研磨液或匀浆液转移至 10ml 离心管，用少量叶绿素提取液冲洗研钵或匀浆器数次，后连残渣一同倒入 10ml 离心管，补加 Chlorophyll Assay buffer 至 10ml，混匀，避光放置 5min-2h。

③观察底部组织残渣接近于白色，即为提取*，如果仍有较多组织颜色，应再加入Chlorophyll Assay buffer 继续避光放置。

④滤纸或三层纱布过滤，留取滤液，即为叶绿素粗提液。

2、分光光度计测定：取叶绿素粗提液加入光径为 1cm 的比色杯，以 Chlorophyll Assay buffer 调零，测定粗提液在 665nm、649nm 处吸光度(A665、A649)。

计算：

叶绿素 a 含量(mg/g)=Ca×V×N/(W×1000)

叶绿素 b 含量(mg/g)=Cb×V×N/(W×1000)

总叶绿素含量(mg/g)=CT×V×N/(W×1000)

式中：Ca=13.95×A665-6.88×A649

Cb=24.95×A649-7.32×A665

CT=6.63×A665-18.07×A649

V=叶绿素粗提液体积(ml)=10(ml)

N=稀释倍数

W=样品鲜重或干重(g)

注意事项：

1、 为了避免叶绿素见光分解，操作时应尽量避光，研磨或匀浆时应尽量缩短时间。

2、 测定吸光度值大于 1 时，可适当稀释后再行测定。

3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。