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乳酸含量（lactic acid ，LA ）试剂盒说明书可见分光光度法
规格：50管/24样
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关，乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。
测定原理
乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸，同时使NAD+还原生成NADH和H+，H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质，在530nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
提取液：液体 55mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 8mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 12mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 支，-20℃避光保存。临用前加入1.2mL蒸馏水充分溶解。
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加12mL蒸馏水充分溶解。
试剂五：粉剂×1 支，4℃避光保存。
标准品：液体 1mL×1 支，4℃保存。
显色液：临用前根据用量按照提取液（V）：试剂三（V）：试剂四（V）：试剂五（m）=1：
0.3：3：15（mg）的比例充分混匀。
样本处理
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，12000g离心10min，取上清测定。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；于 4℃，12000g 离心10min，取上清测定。
3. 血清：直接测定。
测定操作
| 空白管 | 样品对照管 | 样品测定管 | 标准对照管 | 标准测定管 |
样品（μL） |
| 50 | 50 |
|
|
标准品（μL） |
|
|
| 50 | 50 |
H2O（μL） | 500 | 300 | 450 | 300 | 450 |
试剂一（μL） |
| 150 |
| 150 |
|
试剂二（μL） | 200 | 200 | 200 | 200 | 200 |
显色液（μL） | 300 | 300 | 300 | 300 | 300 |
充分混匀，于 37℃反应 30min，于 1mL 玻璃比色皿，空白管调零，测定 530nm 处吸光值， 分别记为 A1，A2，A3，A4，△A 样=A2-A1；△A 标= A4-A3 | |||||
测定操作
注意：空白管、标准对照管和标准测定管只需测定一次
计算公式
1. 按照蛋白含量计算
LA 含量（μmol/mg prot）=△A 样÷△A 标×C 标÷ Cpr
=2×△A 样÷△A 标÷ Cpr
2. 按照样本质量计算
LA 含量（μmol/g）=△A 样÷△A 标×C 标÷ W
=2×△A 样÷△A 标÷ W
3. 按照细胞数量计算
LA 含量（μmol/104cell）=△A 样÷△A 标×C 标÷ 细胞数量
=2×△A 样÷△A 标÷ 细胞数量
4. 按照液体体积计算
LA 含量（μmol/mL）=△A 样÷△A 标×C 标
=2×△A 样÷△A 标
C 标：标准品浓度，2mmol/L ；W：样本质量，g/mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL
注意事项
1. 空白管、标准对照管、标准测定管只需做一次。
2. 若吸光值超过 1.2，请进行适当的稀释后再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
3. 低检出限为 1.8μmol/L。数，500 万。