精子冷冻保护剂

产品简介：

      正常精液是一种混合物，由睾丸和附睾的分泌物及悬浮其中的精子与前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成，终射出的混合物是一种粘稠的液体。精子分析的方法有很多，其中可通过培养进行检测。随着生殖工程技术的兴起及发展，供精人工授精（AID）已经成为治疗某些不可恢复或无法治疗的男性不育症的重要疗法，其中精液冷冻是其中的重要环节。在一定的低温条件下，以一定的时间作用于生物组织细胞，引起细胞的降温、凝固、非损伤性结冰，使生物体内分子运动的速度减慢、停止，从而使细胞代谢降低，处于休眠状态，达到贮存细胞的目的。

         精子冷冻保护剂主要由甘油、葡萄糖、枸橼酸钠、抗生素等组成，经无菌处理，其基本原理是在细胞冷冻过程中随着温度不断下降，细胞外液中作为各种电解质溶剂的水分首先形成细小的颗粒状冰晶，导致细胞外水份减少，电解质浓度增加，细胞外液渗透压升高，使细胞内外液渗透压失去平衡，水分将从渗透压低的内液通过细胞膜流向渗透压高的外液，于是细胞自身脱水皱缩，用冷冻过程中产生的渗透压的梯度使细胞皱缩，而不损伤细胞。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

自备材料：

1、 程序冷冻仪

2、 水浴箱、恒温培养箱

3、 冰箱、液氮罐、冷冻管

4、 1ml 注射器

操作步骤(仅供参考)：

(一)人类精液快速冷冻步骤

1、精液取出后，在 37℃的水浴箱中液化。

2、精液液化后按照 WHO 的标准进行常规分析，包括精液量、颜色、气味、PH 值、液化

状况、精子密度、活动率、圆细胞数等，并做好相关记录。

3、提前将冷冻保护剂复温至室温。

4、将精液与冷冻保护剂按 1:1 的比例混匀，并分装于冷冻管中，冷冻管做好标记。

5、将冷冻管置入 4℃冰箱 15min。

6、将冷冻管置入－80℃液氮蒸气中 15min。

7、将冷冻管投入液氮中冻存。

(二)人类精液程序冷冻步骤

1、精液取出后，在 37℃的水浴箱中液化。

2、精液液化后按照 WHO 的标准进行常规分析，包括精液量、颜色、气味、PH 值、液化

状况、精子密度、活动率、圆细胞数等，并做好相关记录。

3、提前将冷冻保护剂复温至室温。

4、将精液与冷冻保护剂按 1:1 的比例混匀，并分装于冷冻管中，冷冻管做好标记。

5、将冷冻管置于程序冷冻仪中，开始程序冷冻。冷冻程序如下：

1）开始温度：20℃平衡 5-10min；2）20℃→0℃，冷冻速率-1℃/min；3）0℃→-30℃，

冷冻速率-6℃/min；4）-30℃→-80℃，冷冻速率-30℃/min。

6、从程序冷冻仪中取出冷冻管，投入液氮中冻存。

(三)复苏步骤

冷冻过程中精子发生的一系列变化也会表现在解冻时的反向顺序中，而快速复温

(100℃/min 左右)可避免精液在溶解前的再次形冰晶成，具体步骤为：将贮存于液氮中的精

液冷冻管取出，快速放入 37℃的水浴箱中复温即可。

注意事项：

1、 注意无菌操作，尽量避免污染。

2、 影响精液冷冻贮存的因素主要有：冷冻程序、冷冻保护剂、复苏速率、贮存方式，及冷

冻前精液质量等。

3、 人们多使用液氮来贮存精液，液氮是一种无色、无味的气体，其沸点为－195.8℃。具

有低温、不助燃、不自燃、不易爆炸、来源丰富的优点。

有效期：6 个月有效。4℃保存 1 周有效。