改良番红0-固绿软骨染色液说明书

基本信息

 产品简介：

      软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O 法等。
       改良番红 0-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O 结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而成绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织和骨组织区分开。番红O 是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素） 结合。番红O 着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映了基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O 淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O 染色的软骨基质进行定量分析。固绿与胶原纤维结合，不宜褪色。番红 O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。

 产品组成：

规格：5*50ml

有效期：6个月有效

 自备材料：

10%福尔马林固定液，脱钙液，蒸馏水，系列乙醇。

 操作步骤（仅供参考）：

 1、 标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2、 常规脱蜡至水。
3、 入新鲜配制的Weigert 染液染色 3-5min，水洗。

4、 酸性分化液分化 15s。

 5、 蒸馏水洗 10min。
6、 在固绿染色液内浸染 5min。
7、 快速用弱酸溶液洗涤切片 10-15s，以便去除残留的固绿。8、 入Safranin O stain 内浸染 5min。
9、 分别用 95%乙醇、无水乙醇脱水。
10、二甲苯透明，光学树脂封固。

 染色结果：

 软骨基质                                                 深红色 
软骨细胞核                                             蓝色 
细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织           灰绿色 
软骨细胞浆                                              红色 
细胞核                                                     灰黑色 

 改良番红0-固绿软骨染色液注意事项：

 1、 需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。
2、 Weigert 苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般 24h 失去染色能力。
3、 切片在 Safranin O stain 中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4、 切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。
5、 Safranin O stain 染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。
6、 95%乙醇脱水时间不宜过长。
7、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。