小鼠白三烯B4（LTB4）elisa试剂盒的样本处理及注意事项

　　小鼠白三烯B4（LTB4）elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠白三烯B4（LTB4）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄颜色。颜色的深浅和样品中的小鼠白三烯B4（LTB4）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

　　样本处理及要求：

　　1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　注意事项：

　　1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。

　　2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。

　　3. 一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

　　4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。

　　5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请乘以稀释倍数。

　　6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。

　　7. 底物请避光保存。