产品简介:苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称 HE 染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛,苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用 HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察,可确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的,在HE染色的组织切片中细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。
苏木素伊红染色液中苏木素染色液采用 自主研发的配方,由进口的高纯度苏木精、氧化剂等组成,不含、甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好,其特点是不易产生沉淀和金属;应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等,苏木素染色液和伊红染色液可以重复使用。
染色原理:
1、细胞核染色原理:苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色,细胞核内染色质的成分主 要是 DNA,在 DNA 双螺旋结构中两条核苷酸链上的磷酸基向外,使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏 木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色原理:伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色,细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的 pH 值密切相关,当染色液 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质 带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。
3、分化作用:染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分 化作用,所用的溶液称为分化液。在 HE 染色中常用 0.5-1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用盐 酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红 染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
4、返蓝作用:分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用,另外用自来水(尤其是温水)浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。
自备材料:
1、二甲苯或浸蜡脱蜡透明液
2、盐酸乙醇分化液
3、蓝化液,如稀氨水、溶液等
4、系列乙醇、自来水或蒸馏水
5、-乙醇混合固定液、4%多聚甲醛
6、中性树胶
染色结果:
细胞核呈蓝色;细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色;角蛋白、红
细胞等呈明亮的橙红色。
注意事项:
1、切片脱蜡应尽量干净;系列乙醇应经常更换新液。
2、盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便*清洗酸。
3、-乙醇混合固定液是由和 95%乙醇等量混合而得,再加入适量乙酸,密闭保存。
4、冷冻切片染色时间尽量要短。
5、蓝化液常使用 0.2~1%氨水或 Scott 促蓝液或 0.1~1%溶液。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12 个月有效。