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猪ELISA试剂盒有两种洗涤方法来分离

更新时间:2022-11-26 点击次数:463
  猪ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中猪1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)的含量。采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),往预先包被猪1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄颜色。颜色的深浅和样品中的猪1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  猪ELISA试剂盒靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,通过洗涤以去除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。洗涤的方法有两个。
  一、浸泡式
  1、吸干或甩干孔内反应液;
  2、用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);
  3、浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;
  4、吸干孔内液体。可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
  5、重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
  二、流水冲洗式
  初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更好。

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