猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒介绍

【兽用名称】

通 用 名  猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒

商 品 名  无

英 文 名  Blocking ELISA Kit For Detection of Antibodies to Classical Swine Fever Virus  

汉语拼音  Zhuwenbingdu Zuduan ELISA Kangti Jiance Shijihe

【作用与用途】  用于检测猪瘟病毒抗体。

【注意事项】

（1）实验前，将试剂盒取出置25℃±3回温，至少30分钟，实验完成后置2～8℃保存。

（2）若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。

（3）请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。

（4）没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内，置2～8℃存放。

（5）避免底物液暴露于强光，避免接触氧化剂。

（6）浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

（7）严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常必要的。

（8）使用血清稀释板将所有待检血清稀释好，再进行检测。

【用法与判定】  

1  用法

1.1  样品准备  取动物全血，待血液凝固后，4000r/min离心10分钟，收集上清。或采集血液，待凝固后自然析出血清。血清应清亮，无溶血。

1.2  样品稀释  在血清稀释板中，用样品稀释液按1:1的比例稀释待检血清（例如：120μl样品稀释液中加120μl待检血清）；阴性、阳性对照不稀释，直接使用。

1.3  洗涤液配制20倍浓缩洗涤液使用前应恢复至室温（20~25℃），摇动使沉淀溶解（建议在37℃水浴锅中加热至溶解），然后用蒸馏水或纯水作20倍稀释，混匀（例如：10ml的浓缩洗涤液加上190ml纯水）。稀释好的洗涤液在2~8℃可以存放7日。

1.4  操作步骤

1.4.1  取抗原包被板（根据样本多少，可拆开分次使用），每孔加入稀释好的洗涤液300µl，不必静置，弃掉孔中洗涤液，洗涤2次，最后一次拍干。每孔加入稀释好的样本100μl；另外设阳性对照、阴性对照各2孔，100μl/孔。置37℃孵育60分钟。

1.4.2  弃去板中液体，每孔加入稀释好的洗涤液300µl，不必静置，弃掉孔中洗涤液，重复洗涤共计洗板5次，最后一次拍干。

1.4.3  每孔加入100μl酶结合物，轻微振荡混匀。置37℃下孵育30分钟。

1.4.4  弃去板中液体，洗涤5次，方法同1.4.2。

1.4.5  每孔加底物显色液100µl，室温（20~25℃）避光显色10分钟。

1.4.6  每孔加终止液50µl。10分钟内用酶标仪测定并记录各孔在630nm波长处的吸光度（OD）值（测定前轻轻振匀，勿溢出）。

2  判定

2.1  成立条件  在酶标仪上测各孔OD_630nm值，试验成立条件是阴性对照的OD_630nm平均值≥0.6，阳性对照的OD_630nm平均值≤0.5

2.2  判定标准  S为样品孔OD_630nm值，N为阴性对照OD_630nm平均值。

阻断率=（1-S/N）×100%

如果阻断率<40%，判为猪瘟病毒抗体阴性；

如果阻断率≥40%，判为猪瘟病毒抗体阳性。

【规格】96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【贮藏与有效期】  2~8℃保存，有效期为12个月。