丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)

产品简介：

     动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress) 时，会发生脂质氧化，丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA在内的复杂化合物，此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如thromboxane synthase 也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。 

自备材料：

1、生理盐水或 PBS

2、离心机、离心管或 96 孔板、光分光光度计或酶标仪、水浴锅或恒温箱

操作步骤(仅供参考)：

1、准备样品：

①血清、血浆、尿液、脑脊液样品：从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水或 PBS 稀释后检测。

②组织、细胞等样品：组织或细胞可以使用PBS或 RAPI裂解液等进行匀浆或裂解，匀浆或裂解组织时组织重量占匀浆液或裂解液的比例应为10%；对于细胞，每106个细胞使用 0.1ml裂解液或匀浆液，匀浆或裂解后4℃ 8000~12000g 离心10min，取上清用于后续测定。匀浆或裂解等样品制备步骤宜在冰浴或 4℃条件下进行操作，样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内MDA 含量。

③该试剂盒对于样品中的常见化学成分的兼容性参考下表：

2、配制TBA 工作液：称取适量TBA，用TBA稀释液配制成浓度为0.68％的TBA工作液； 例如取68mgTBA用10ml TBA 稀释液配制，最终浓度即为0.68%的TBA工作液，TBA工作液需溶解后再使用，可以加热到 60℃促溶，并可通过反复剧烈Vortex促溶； 配制

好的TBA工作液 4℃避光保存，至少1个月内有效。

3、稀释系列标准品：取适量 MDA 标准品(1mmol/L)，用恰当溶液稀释至 1、2、5、10、20μM(如果进行简易快速检测，标准品直接稀释10μM)。注意：待测样品为血清、血浆时，标准品宜用生理盐水稀释；待测样品由匀浆液、裂解液、PBS 获得时，标准品宜用相同溶液稀释，其原则是保证空白管、标准管、测定管具有可比性；配制好的 MDA标准品 4℃避光保存，至少3个月内有效。

4、配制MDA检测工作液：临检测前，根据待测定的样品数(含对照)，参考下表新鲜配制适量的MDA检测工作液。

注意事项：

1、上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。

2、参考取样量：血清、血浆、尿液取0.1ml；低密度脂蛋白悬液取0.1~0.2ml；食用油取0.03ml；肝脏、心肌、肌肉等，取5%或10%匀浆 0.1~0.2ml。

3、测定样品吸光度值较低时，可将水浴延长至80min，但应同时延长，以免造成批间差异。

4、待测样本如不能及时测定，应置于-20℃保存，4天内稳定。

5、避免使用 EDTA、枸橼酸、氟化钠、草酸等抗凝剂。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

有效期：12个月有效；低温运输，按要求保存。