药物对细胞周期的影响

药物对细胞周期的影响

     药物对细胞周期的影响可以利用流式细胞术从几个方面进行研究，在方法上，是相对简单的实验工作，然而，所涉及的原理可能是十分复制的。这方面的主要工作是研究抗肿瘤药物对细胞的作用，以期望找出肿瘤对药物的敏感时相、药物对肿瘤细胞的杀伤机理等。但是，由于肿瘤细胞的生长都是不受限制的，其生长速率与正常细胞相比，有快有慢，难以一概而论。例如在某些肿瘤中，具有活性的增殖细胞占有较高的比例，比如白血病和淋巴病细胞，这样的肿瘤生长速率较快；但多数恶性肿瘤是实体瘤，其增殖部分可能仅占一个较小的比例，因而生长速率又是相对较低的。这样，我们在做药物实验时选定何种细胞进行实验就显的很重要了。实验的方法可用药物脉冲作用或连续作用后的时间序列一维DNA直方图或DNA与RNA二维图（假三维图）进行时间序列分析。当然，在开始实验前要作药物影响细胞的生长曲线，选出使药物即不严重杀伤细胞，同时对细胞的生长抑制又zui明显的剂量，至于是用体外培养细胞还是用活体进行实验，要看各方面的要求和条件来决定。

 图是阿克拉霉素B（Aclacinomycin B）对小鼠L₁₂₁₀白血病细胞影响的一维DNA直方图时间序列结果。左边是实验药物组，右边是做为对照的阿克拉霉素A组。时间顺序自下而上分别为0小时，8小时、24小时、48小时、。在8小时组可见早、中S期的积累，积累的百分比可定量计算出来，但积累到48小时有所恢复。做为对照的药物和实验药物半致死量是不一样的，实验中都选取半致死量的40%以便比较。这样时间序列的一组图虽然能定量地说明一些问题，但如果能够做时间序列的DNA—RNA二维图，会发现一些一维直方图不可能发现的现象。

     图中8小时、24小时阿克拉霉素B的RNA—DNA二维点图。此组序列中值得注意的是中间一个图。在上节中，我们曾讨论过G₁时相可分为G_IA和G_IB两个室，G_IA室的细胞只有当RNA值超过阔值进入G_IB室后才能进入S期。实际上，这些进入S期的细胞在进行DNA复制的同时，其RNA也在同步增长，这样的同步增长的过程我们称为正平衡生长。但在图中24小时的那个图上可以看到，对应S期部分的细胞，在DNA增长的同时，其RNA’值似乎有平均减少的趋势，这样的过程称为负平衡增长。显然，这样的现象在单纯使用直方图时是不能发现的。

 用流式细胞术研究药物影响的方法，还可以在较为复杂的模型基础上进行更复杂的实验。当对一些具有细胞周期特异性药物进行研究时，可能会发现特异性作用的浓度依赖性。有人曾发现，用适宜的浓度可以使S期阻断剂变成G₂期阻断剂。这种种复杂性都会使研究药物对细胞周期的作用潜在着极大的困难。