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小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒试验操作步骤

更新时间:2014-12-30 点击次数:1250

【青岛捷世康】小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒操作步骤

小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒用于测定小鼠血清、血浆以及相关液体样本中抑制素b的含量。

小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒试验操作步骤

1  小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒2-8度保存环境中取出需要在实验室常温环境中做温度平衡处理15-20分钟,与小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒实验器具及样本保持温度一致后方可使用.以免造成数据不准确.

2  小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为360μg/ml,240μg/ml ,120μg/ml,60μg/ml, 30μg/ml)。(ELISA试剂盒:小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒))

  • 加样:在加注各类用品时请用的加样器,使用前校准加样器,加样时间控制在一定时间内5分钟为宜.样品较多时用产品推荐排枪.分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  • 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  • 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
  • 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  • 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  • 温育:操作同3。
  • 洗涤:操作同5。
  • 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 
  • 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  • 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

ELISA试剂盒:小鼠抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒)

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