青岛捷世康生物科技有限公司分享影响化学发光面议分析的因素

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1、样品的浑浊度可以测定的灵敏度降低。这主要是因为多数分光光度计只能测出样品中发射出的中能量，不包括散射光。样品本身的混度高，不仅可以出现一定的吸光度

2、反应体系的PH值也与检测结果密切相关，反应物的颜色可随着ph值而变化，而颜色的深浅又支架影响着吸光度。当ph值增高有助于提高鲁米诺衍生物的发光强度，但同时较高的PH值又容易引起抗原抗体复合物的解离。标准品

3、发光反应的实现与温度有密切的关系。实验温度的变化不仅影响反应的速率，而且使光谱移动，对发光素酶类反应来说，zui合适的反应温度为25-28摄氏度。

4、在发光素素酶参与反应中，高浓度的盐类和缓冲液可以抑制酶的活性，对发光反应起干扰作用。

5、血清中的某些发光成分（如腺嘌呤核苷酸）和能直接引起发光反应的酶类（如细胞色素氧化酶），也可能成为干扰因素。因此，再利用固相法检测试验时，加待检血清样品，反应后应充分洗涤，以消除这类干扰因素。

6、试验中酶-结合抗体与故乡载体量的多少。

亲和素-生物素系统

亲和素是由鸡卵蛋白中提取的，分子量为680000Da，由4个亚单位组成的，对生物素具有高度的亲和性，一个亲和素分子可以牢固结合四个生物素分子。

生物素为244.2Da的小分子物质，也称为维生素H，同时也是羧基转化酶，故又称为辅酶R。生物素分子上的羧基经过化学修饰后，可以导入各种蛋白质分子（抗原或抗体）或酶分子中。导入生物素的抗原或抗体，其性质不变；导入生物素的酶分子，其催化活性也保持不变或稍有降低

亲和素-生物素系统是通过亲和素对生物素的高度亲和力，与导入了生物素的酶分子切切结合，形成晶格样复合物，这个复合物上的亲和素还可同导入生物素的特异性抗体结合，再去链接相应的抗原，经酶催化底物呈色，这样就可以测定抗原和抗体。

亲和素-生物素系统的检测方法可分为：亲和素-生物素家架桥法、标记亲和素-生物素法和亲和素-生物素复合物法。

亲和素-生物素系统的特点是

1、生物素的分子量比较小，导入抗体分子之后，抗体的分子量和特异性变化均不大

2、生物素分子与酶分子或抗体之间结合的方法操作简便，结合牢固可靠、未结合的游离生物素容易通过简答的透析方法除去。

3、亲和素-生物素系统的试剂稳定性好。

4、亲和素-生物素的亲和力高，一般来说较抗炎抗体之间的亲和力要高100万倍左右，而且酸碱变性剂、蛋白溶解酶及有机溶剂均不影响亲和素与生物素之间的结合作用

亲和素-生物素系统的应用主要有：

1、酶、荧光和放射免疫的测定，主要对象为可溶性细菌抗原、病毒抗原和肿瘤相关抗原及其相应的抗体。他可以显著提高检测的灵敏度，放大抗体的效价。

2、细胞表面纷纷（抗原、抗体和其他表面结构）的测定和定位。以及免疫组织化学染色。

3、以生物素化核苷酸做干镇，进行核算杂交和基因图谱分析。

4、在单克隆抗体的检测和筛选，免疫印迹法和共帽化分析中代替常规试剂。

5、制备抗原和看题的免疫吸附柱，纯化相应的配体。

6、分离细胞表面抗原核受体

7、与细胞荧光分析仪联用以分离细胞及其亚群。

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