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如何使用染色试剂盒进行样本的染色处理

更新时间:2020-11-24 点击次数:872
  染色试剂盒由苏木精染色剂和EA/OG混合染色剂组成,用于在非妇科样本制备中,和PrepStain液基细胞自动制片机配合使用,对临床样本进行染色,以便样本的进一步筛查和检测。
  样本的染色处理:
  一、血涂片及骨髓涂片
  1、推片:取全血或骨髓3μl左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30°角,置于血滴正前方,稍微往后移与血滴接触,血滴沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动,至血滴铺完血膜为止。不要太薄,以免细胞太少,也不要太厚,以免太重叠。
  2、固定:让涂片在空气中自然晾干,再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟,水洗30-60秒。
  3、孵育:水洗后还未*干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
  4、复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未*干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。
  二、细胞涂片及细胞爬片
  1、固定:将细胞涂片或细胞爬片放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟,水洗30-60秒。
  2、孵育:水洗后还未*干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
  3、复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未*干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。
  三、冰冻切片
  1、回温:将保存在-20℃冰箱中的冰冻切片放置到切片架上回温5-10分钟。可以放在37℃孵箱中进行回温,或者将切片架放置在一个小盒子中,将盒子置于37℃水浴锅中进行回温。
  2、水合:将回温好的切片,水中浸泡1-2分钟。
  3、固定:让切片在空气中自然晾干,再放入本试剂盒中的固定液中固定2-3分钟,水洗30-60秒。
  4、孵育:水洗后还未*干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
  5、复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未*干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。
  四、石蜡切片
  1、脱蜡:二甲苯中脱蜡5-10分钟。再换用新鲜的二甲苯脱蜡5-10分钟。
  2、无水乙醇浸泡5分钟。再分别用90%、70%乙醇各2分钟。
  3、水合:蒸馏水中浸泡2分钟。
  4、孵育:还未*干前放入底物孵育液中避光孵育60分钟。太干后染色效果会变差。
  5、复染:孵育完后,取出水洗1分钟,在玻片未*干前进行复染。可用苏木素复染1-2分钟,或者用甲基绿复染2-3分钟,两者任选其一即可。

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