ELISA试剂盒的样品收集、处理及保存方法

　　ELISA试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的药物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗药物抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含药物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中药物的残留量。

　　ELISA试剂盒的样品收集、处理及保存方法：

　　1、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2、血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

　　3、细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

　　5、保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。-20℃取出后建议放入2～8℃冰箱中解冻约，每隔一段时间轻轻摇晃均匀，不可直接放入温度较高处解冻，避免因温度改变太大，造成蛋白质凝集而出现沉淀，血清的质量下降。若短期无法用完一瓶，建议无菌分装,再放回冷冻，避免反复冻融。4℃长时间保存后血清中的变性脂蛋白及纤维蛋白，形成絮状物质变差。

　　在成批手艺检测中，还应留神操作时差的影响。加样及混匀时间的差异，使抗原抗体反响和酶促反响时间不一致，对竞争法及定量检测影响很大，不留神可能会导致过错效果或定量不准。