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人白介素Elisa试剂盒的使用方法和注意事项

更新时间:2022-05-27 点击次数:426
  人白介素Elisa试剂盒灵敏、高校、均匀、吸附性好、回收率高。用双抗体夹心法测定人白细胞介素水平,纯化后的人白细胞介素抗体用微孔板包被制成固体抗体。然后将抗体加入包被的单克隆抗体的微孔中,与HRP标记的IL抗体结合形成抗体-抗原-酶-抗体复合物。清洗后,加入基质TMB显色。
  一、使用方法:
  1、试剂准备:所有试剂都须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
  2、加样:加样或试剂时,请注意,取样/标准品、酶复合物或底物时,前孔与后孔加样的时间间隔过大,会导致“孵育”时间不同,这将显着影响测量值的准确性和重复性。一次加样时间(包括标准品和所有样品)控制在10分钟以内。如果样品较多,建议用多通道移液管加样。
  3、孵育:为防止样品蒸发,试验时应将反应板放在一个用湿布覆盖的封闭箱内,并对酶板进行覆盖或涂膜,以防液体蒸发;清洗后应尽快进行下一步操作,酶板应随时保持干燥同时,严格遵守给定的孵育时间和温度。
  4、洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
  5、试剂配制:使用前,检测A和检测B应离心几次或几次以下,然后再使用,使液体沉积在管壁或瓶盖上,直至管底。标准品、供试品溶液的工作液a和工作液B应按要求量使用,并用相应的稀释剂配制,不能混淆。请务必配置好标准液和工作液,尽量不要微量配置(如果检测液a被吸收,一次不得少于10μl),以免稀释不准确造成浓度误差;不要重复使用稀释后的标准液、工作液a或工作液B。
  6、反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
  7、底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
  二、使用注意事项:
  1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  3、加样的每一步都应使用加样装置,并应经常检查其准确性,以避免试验误差。一次加样时间应控制在5分钟以内。如果样品多,建议使用枪添加样品。
  4、每次测量时请同时做标准曲线,好做双孔。如果待测物质含量过高(样品的OD值大于标准样品孔一孔的OD值),请用样品稀释剂稀释一定倍数(n倍)后再测量。计算时,请乘以总稀释倍数(× n× 5)。
  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6、底物请避光保存。
  7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定须以酶标仪读数为准.
  8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
  9、本试剂不同批号组分不得混用。

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