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高铁血红蛋白还原检测试剂盒(比色法)说明书

更新时间:2022-09-13 点击次数:380

产品简介:

红细胞酶缺陷的检查可通过高铁血红蛋白还原实验、抗坏血酸、Heinz 小体等检测,  高铁血红蛋白还原检测试剂盒采用 Schumm 法,其检测原理是在有足够的NADPH 存在下,高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还原成亚铁血红蛋白,当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶含量正常时,由磷酸戊糖代谢途径生成的 NADPH 的数量足以完成上述还原反应当红细胞内 G6PD 含量不足或缺乏时,高铁血红蛋白还原速度减慢,甚至不能还原,高铁血红蛋白呈褐色,用分光光度计在 635nm 波长处检测。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。


产品组成:

      

名称

规格

50T

Storage

试剂(A): 抗凝剂

5ml

4℃

试剂(B): Hb Assay Buffer

1.5ml

4℃

试剂(C): Hb 显色液

1.5ml

4℃ 避 光

试剂(D): G6PD Buffer

100ml

4℃

使用说明书

1 份

自备材料:

1、离心管或试管

2、水浴锅或恒温箱

3、比色杯

4、分光光度计

 

操作步骤(仅供参考)

1、取新鲜静脉血 0.9ml,加入抗凝剂 0.1ml,充分混匀。

2、低速离心 15min,取出,调整血细胞与血浆比例为 1:1 后再混匀。

3、取上述抗凝血 0.5ml,加入 Hb Assay Buffer 和 Hb 显色液各 0.025ml,颠倒混匀 15 次,使与氧气充分接触,加塞或密封后放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。混匀, 取上述血液 0.02ml 加入 G6PD Buffer 2ml。

上述操作,可见下表:

     

加入物(ml)

空白管

测定管

抗凝血

0.5

0.5

Hb Assay Buffer

0.025

Hb 显色液

0.025

0.025

混匀,放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。

取上述反应液

0.02

0.02

G6PD Buffer

2

2

4混匀,室温放置 2min,比色杯光径 1cm,用分光光度计 635nm 处测定空白管和测定管吸光度,分别命名为 SA  B。

5、向空白管加入 Hb Assay Buffer 0.025ml,混匀,室温放置 5min,再次用分光光度计

635nm 处测定空白管吸光度命名为 ST

 

计算:高铁血红蛋白还原率(%)={1-(SA-B)/(ST-B)}×100% 参考区间:一般应超过 75% 

注意事项:

1、 红细胞比容低于 30%时,高铁血红蛋白还原率显著下降,需调整红细胞与血浆的比例。

2、 样本不应有凝血或溶血,以免影响测定。

3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

有效期:6 个月有效。


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地址:山东青岛市青大工业园韩海路
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