产品简介:
红细胞酶缺陷的检查可通过高铁血红蛋白还原实验、抗坏血酸、Heinz 小体等检测, 高铁血红蛋白还原检测试剂盒采用 Schumm 法,其检测原理是在有足够的NADPH 存在下,高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还原成亚铁血红蛋白,当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶含量正常时,由磷酸戊糖代谢途径生成的 NADPH 的数量足以完成上述还原反应当红细胞内 G6PD 含量不足或缺乏时,高铁血红蛋白还原速度减慢,甚至不能还原,高铁血红蛋白呈褐色,用分光光度计在 635nm 波长处检测。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
名称
规格
50T
Storage
试剂(A): 抗凝剂
5ml
4℃
试剂(B): Hb Assay Buffer
1.5ml
试剂(C): Hb 显色液
4℃ 避 光
试剂(D): G6PD Buffer
100ml
使用说明书
1 份
自备材料:
1、离心管或试管
2、水浴锅或恒温箱
3、比色杯
4、分光光度计
操作步骤(仅供参考):
1、取新鲜静脉血 0.9ml,加入抗凝剂 0.1ml,充分混匀。
2、低速离心 15min,取出,调整血细胞与血浆比例为 1:1 后再混匀。
3、取上述抗凝血 0.5ml,加入 Hb Assay Buffer 和 Hb 显色液各 0.025ml,颠倒混匀 15 次,使与氧气充分接触,加塞或密封后放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。混匀, 取上述血液 0.02ml 加入 G6PD Buffer 2ml。
上述操作,可见下表:
加入物(ml)
空白管
测定管
抗凝血
0.5
Hb Assay Buffer
-
0.025
Hb 显色液
混匀,放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。
取上述反应液
0.02
G6PD Buffer
2
4、混匀,室温放置 2min,比色杯光径 1cm,用分光光度计 635nm 处测定空白管和测定管吸光度,分别命名为 SA 和 B。
5、向空白管加入 Hb Assay Buffer 0.025ml,混匀,室温放置 5min,再次用分光光度计
635nm 处测定空白管吸光度命名为 ST。
计算:高铁血红蛋白还原率(%)={1-(SA-B)/(ST-B)}×100% 参考区间:一般应超过 75%
1、 红细胞比容低于 30%时,高铁血红蛋白还原率显著下降,需调整红细胞与血浆的比例。
2、 样本不应有凝血或溶血,以免影响测定。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6 个月有效。
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