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兔ELISA试剂盒的原理是怎样的?
更新时间:2016-05-26 点击次数:1764
一般细胞因子的检测,都是采用常规的夹心法ELISA检测,由于因子分子量比力大,一般10几个KD左右,很容易找到两个或多个抗原表位。而小分子很难找到两个不通的表位,也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案便是酶标板上包被二抗,每个孔加入一定量的酶标的小分子,然后加样品,再加不带标志的检测抗体,显色底物。样品的目标小分子的含量越高,吸光度越低。病原体抗原的定性与定量,评估自己制备的血清抗体的效价等。
兔ELISA试剂盒
中封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。蛋白和非离子型去污剂。如果未结合的材料残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。
兔ELISA试剂盒
如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高,或者未正确稀释,则会导致高背景。固相载体表面有能被此蛋白质*覆盖,
兔ELISA试剂盒
其后加入的血清标本和酶结合物,其中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面,zui后产生非特异性显色而导致本底偏高。
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