氯霉素检测试剂盒（酶联免疫法）

基本信息

产品名称：氯霉素检测试剂盒（酶联免疫法）

规格：96T

介绍：

 1 原理及用途

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测水产组织、畜禽组织、肝脏、蛋类、蜂蜜、牛奶、饲料及水等样本中的氯霉素药物（Chloramphenicol，CAP），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样本溶液，样本中的氯霉素药物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗氯霉素药物抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含氯霉素药物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中氯霉素药物的残留量。

2 技术指标

2.1 试剂盒灵敏度：0.025ppb(ng/ml)

2.2 反应模式：25℃，30min～30min～15min

2.3 检测下限：

组织、肝脏、蜂蜜、牛奶……………0.0125ppb

水样……………………………………0.05ppb

蛋类……………………………………0.1ppb

尿液、血清、肠衣、饲料、奶粉……0.025ppb

2.4 交叉反应率：

氯霉素 …………………………………100%

甲砜霉素、氟甲砜霉素………………＜0.1%

 2.5 样本回收率：

组织、肝脏……………………………85%±20%

蜂蜜、肠衣、蛋类……………………85%±25%

牛奶、饲料……………………………75%±25%

尿液、血清……………………………70%±20%

水样……………………………………90%±20%

3 试剂盒组成

酶标板……………………………96孔

标准液：各1ml

0ppb、0.025ppb、0.075ppb、0.225ppb、0.675ppb、2.025ppb

高标准液（红盖）：100ppb………1ml

酶标记物（红盖）…………………11ml

抗体工作液（蓝盖）………………5.5ml

底物液A（白盖）……………………6ml

底物液B（黑盖）……………………6ml

终止液（黄盖）………………………6ml

20×浓缩洗涤液（白盖）……………40ml

2×复溶液（黄盖）…………………50ml

说明书…………………………………1份

盖板膜…………………………………1张

自封袋…………………………………1个

4 需要的器材和试剂

4.1 仪器：酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

4.3 试剂：乙酸乙酯、正己烷、醋酸钠、醋酸

、、葡萄糖苷酸酶、硫酸锌（ZnSO4·7H2O）

5 样本前处理

5.1 样本处理前须知：

实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

5.2 配液：

配液1：0.36M亚硝基铁溶液（牛奶、奶粉样本）

10.7g亚硝基铁加去离子水混匀溶解，定容至100ml。

配液2：1.04M硫酸锌溶液（牛奶、奶粉样本）

    29.8g硫酸锌加去离子水混匀溶解，定容至100ml。

配液3：0.1M pH4.8醋酸钠缓冲液（尿液样本）

    2.4g醋酸钠加去离子水混匀溶解，定容至500ml，再加1.2ml醋酸混匀。

配液4：复溶液（若检测样本为水样，请勿稀释，直接使用）

将2×复溶液用去离子水2倍稀释（1份2×复溶液加1份去离子水），用于样本的复溶，复溶液在4℃环境可保存一个月。

配液5:工作洗涤液

    将浓缩洗涤液20倍稀释(1份洗涤液加19份去离子水)。

5.3 样本前处理步骤：

5.3.1 组织、鱼、虾、肝脏样本处理方法 

1）称取均质后的样本3±0.05g于50ml离心管中，先加入3ml去离子水振荡混匀，再加入6ml乙酸乙酯振荡2分钟，室温4000转/分离心10分钟；

2）取上层液体2ml在50-60℃下氮气吹干；

3）用1ml正己烷溶解干燥的残渣，再加入0.5ml复溶液，混合30秒，室温4000转/分离心5分钟；

4）去除上层有机相，取下层水相50μl进行分析。

    样本稀释倍数：0.5    检测下限：0.0125ppb

5.3.2 血清、血浆样本处理方法

1）取1ml血清或血浆至离心管中，加入2ml乙酸乙酯振荡1分钟，室温4000转/分离心5分钟，或静置使水相与有机相分离；

2）取1ml上层液体在50-60℃下氮气吹干；

3）用1ml正己烷溶解干燥的残渣，再加入0.5ml复溶液，混合30秒，室温4000转/分离心5分钟；

4）去除上层有机相，取下层水相50μl进行分析。

    样本稀释倍数：1    检测下限：0.025ppb

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