线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性测试盒-可见分光光度法

线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性测试盒-可见分光光度法

参数规格  产品资料  工作原理  测定意义  产品图片  订购流程  注意事项  合作单位

参数规格：

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产品资料：

试剂一：25mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂二：25mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂三：1 mL×1 瓶，-20℃保存； 试剂四：粉剂×1 支，-20℃保存；临用前每支加入1.3mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的 试剂仍-20℃保存; 试剂五：6mL×1 瓶，4℃保存； 试剂六：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入3mL 蒸馏水，充分混匀; 试剂七：粉剂×1 瓶, 4℃保存；临用前加入10mL 蒸馏水，充分混匀; 试剂八：粉剂×1 瓶, 4℃保存；临用前加入10mL 蒸馏水，充分混匀; 试剂九：液体10mL×1 瓶，室温保存。 定磷试剂的配制：按H2O: 试剂七:试剂八:试剂九=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷试剂应 为浅黄色。若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染（请根据需要，用多少配多少）。 注意：配试剂用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，或者一次性塑料器皿，以避免磷污染。
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工作原理：织及血液碱性磷酸酶（AKP/ALP）测试盒-可见分光光度法
复合体Ⅴ水解ATP 产生ADP 和Pi，通过测定Pi 增加速率来测定复合体Ⅴ活性。
测定意义：
线粒体复合体Ⅴ又称F1F0-ATP合酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，由F1和F0两个亚单位组成。该酶利用呼吸链产生的质子电化学梯度催化ATP合成，也可逆过程水解ATP。此外，复合体Ⅴ还存在于叶绿体、异养菌和光合细菌中。复合体Ⅴ是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化合成ATP的关键酶。
标本处理：
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：
1 准确称取0.1g 组织或收集500 万细胞，加入1mL 试剂一和10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2 将匀浆600g，4℃离心5min。
3 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11100g，4℃离心10min。
4 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白，可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅴ（此步可选做）。
5 步骤④中的沉淀即为线粒体，加入800uL 试剂二和8uL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10 秒，重复30 次），用于复合体Ⅴ酶活性测定。
订购流程：
    1、报价含普票、运费。
    2、常用试剂备货充足，除对温度要求极其严格的产品当天可发货。
    3、进口原装产品要3-6周的货期，详细情况请咨询客服。
    4、订货时间为工作日每周一至周五16:00之前。
    5、如需代为检测，标本对环境温度高，可客服安排专人取样（限省内客户）。
    6、代测免收代测费，一周出结果。
    7、产品因运输途中包装破损请拒绝签收，做退回。我们将在24小时之内为您补发损坏产品
    8、如因单位财务制度原因，可申请先发货，报账后付款（此条款仅限医院、学校信誉良好
          客户）。
注意事项：
影响显色反应的主要因素有哪些？
影响显色反应的主要因素有显色剂的用量、溶液的酸度、显色时间以及干扰离子等。
为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，如何选择zui适宜的测量条件？
一般从以下几个方面来考虑：
①选择适当的测量波长。一般根据待测组分的吸收光谱选择zui大吸收波长作为测量波长。如果干扰组分在zui大吸收波长也有吸收,则应根据：吸收大，干扰小"的原则来选择测量波长
②调价溶液的浓度，或选用不同厚度的吸收池，控制被测是呀的吸光度在0.2-0.8范围内。
③选择适当的参比溶液。
在分析复杂样品时，如何消除干扰？
消除干扰方法主要有：
1、加入眼笔记，如加入配位掩蔽剂，使其与干扰离子生成测定波长物吸收的配合物，如加入氧化还原掩蔽剂，改变干扰离子的价态。
2、选择适宜的显色条件，如控制溶液的酸度等，使干扰离子与显色剂不发生反应。3、采用双波长或其他选择性的方法；
4、分离干扰离子。
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