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Product CenterBCA蛋白浓度测定试剂盒
品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | 货号 | PC0020 |
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规格 | 50T;10*50T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研实验 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,综合 |
基本信息
英文名称
BCA Protein Assay Kit
中文名称
BCA蛋白浓度测定试剂盒
规格
50T(500微孔) ; 10*50T(500微孔)
储存条件
BSA附件-20℃,其它试剂RT,有效期1年
产品简介:
碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA, EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
操作说明:
一. 微孔酶标仪法
1. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品:取10μL BSA标准品用PBS稀释至100μL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL。将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足至20μL。
3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20μL到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
BCA蛋白浓度测定试剂盒4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。