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α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒
参数规格 产品资料 工作原理 订购流程 合作单位
参数规格:
编号 | 产品名称 | 检测方法 | 规格 |
KY110 | α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒 | 微量法 | 100管/96样 |
产品资料:
试剂一:100mL×1 瓶,-20℃保存; 试剂二:20mL×1 瓶,-20℃保存; 试剂三:1.5mL×1 支,-20℃保存; 试剂四:液体20mL×1 瓶,4℃保存; 试剂五:粉剂×1 瓶,-20℃保存; 试剂六:粉剂×1 支,-20℃保存; | 电子名片 |
工作原理:
α-KGDH 催化α-酮戊二酸、NAD+ 和辅酶A 生成琥珀酰辅酶A、二氧化碳和NADH,NADH在340 nm 有特征吸收峰,以NADH 的生成速率表示α-KGDH 活性。
测定意义:
α-KGDH(EC 1.2.4.2)广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中,是三羧酸循环调控关键酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶A。
标本处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
1、称取约0.1g 组织或收集500 万细胞,加入1mL 试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2、将匀浆600g,4℃离心5min。
3、弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
4、上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的α-KGDH(此步可选做)。
5、在步骤④的沉淀中加入200uL 试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3 秒,间隔10 秒,重复30 次),用于线粒体α-KGDH 活性测定。
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试剂类:SIGMA、AMERSCO、TCI
血? 清:GIBCO、HYCLONE、四季青、MRC
抗? 体:ABCAM、SANTA、CST
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其他规格产品:NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒
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